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      凝膠色譜法的原理是什么(凝膠色譜法介紹)

      2024-03-14 04:13:23 來(lái)源: 用戶: 

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      1、凝膠色譜法又稱為凝膠過(guò)濾法、 凝膠層析、凝膠滲透層析、通透層析、分子篩層析。

      2、凝膠色譜技術(shù)是六十年代初發(fā)展起來(lái)的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離分技術(shù),由于設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便,不需要有機(jī)溶劑,對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果。目前已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用,不但應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。

      3、凝膠的種類及性質(zhì)

      (1)交聯(lián)葡聚糖凝膠(Sephadex)

      交聯(lián)葡聚糖的商品名為Sephadex,不同規(guī)格型號(hào)的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯?dāng)?shù)為凝膠得水值的10倍。例如,G-25為每克凝膠膨脹時(shí)吸水2.5克,同樣G-200克每克千膠吸水20克。交聯(lián)葡聚糖凝膠的種類有G-10,G-15,G-25,G-50,G-75,G-100,G-150,和G-200。因此,“G”反映,凝膠的交聯(lián)程度,膨脹程度及分部范圍。

      (2)Sephadex LH-20,是Sephadex G-25的羧丙基衍生物, 能溶于水及親脂溶劑,用于分離不溶于水的物質(zhì)。

      (3)瓊脂糖凝膠:

      商品名很多,常見(jiàn)的有,Sepharose(瑞典,pharmacia ),Bio-Gel-A(美國(guó)Bio-Rad)等。瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級(jí)鏈如氫鍵來(lái)維持網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下,它的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的,可以在許多條件下使用(如水,pH4-9范圍內(nèi)的鹽溶液)。瓊脂糖凝膠在40℃以上開(kāi)始融化,也不能高壓消毒,可用化學(xué)滅菌處理。

      (4)聚丙烯酰胺凝膠:

      是一種人工合成凝膠,是以丙烯酰胺為單位, 由甲叉雙丙烯酰胺交聯(lián)成的,經(jīng)干燥粉碎或加工成形制成粒狀,控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號(hào)的凝膠。交聯(lián)劑越多,孔隙越小。聚丙烯酰胺凝膠的商品為生物膠-P (Bio-Gel P),由美國(guó)Bio-Rad廠生產(chǎn),型號(hào)很多,從P-2至P-300共10種,P 后面的數(shù)字再乘1000就相當(dāng)于該凝膠的排阻限度。

      (5)聚苯乙烯凝膠商品為Styrogel , 具有大網(wǎng)孔結(jié)構(gòu), 可用于分離分子量1600到40,000,000的生物大分子,適用于有機(jī)多聚物,分子量測(cè)定和脂溶性天然物的分級(jí),凝膠機(jī)械強(qiáng)度好,洗脫劑可用甲基亞砜。

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