雙縮脲試劑的配制方法以及注意事項(xiàng)(雙縮脲試劑怎么配)
哈嘍,大家好~~~我是小編田甜,關(guān)于雙縮脲試劑的配制方法以及注意事項(xiàng),雙縮脲試劑怎么配這個(gè)很多人還不知道,那么現(xiàn)在讓田甜帶著大家一起來(lái)看看吧!
1、堿性條件下,雙縮脲h2n-co-nh-co-nh2可以和cu離子作用生成紫色沉淀。
2、靈敏度差,測(cè)定范圍窄,樣品需要量大,不同的蛋白質(zhì)產(chǎn)生顏色的深淺相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精確的蛋白質(zhì)測(cè)定。
3、 干擾測(cè)定的物質(zhì)包括有:在性質(zhì)上是氨基酸或肽的緩沖液,如TrIs緩沖液,因?yàn)樗鼈儺a(chǎn)生陽(yáng)性呈色反應(yīng),銅離子也容易被還原,有時(shí)出現(xiàn)紅色沉淀。
4、配制:雙縮脲試劑A是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1 g/mL的NaOH水溶液;雙縮脲試劑B是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01 g/mL的CuSO4水溶液。
5、先在待測(cè)液中加入雙縮脲試劑A 3mL,振蕩均勻(營(yíng)造堿性環(huán)境),再加入1~2滴雙縮脲試劑B,振蕩均勻。
6、如果待測(cè)液里含有蛋白質(zhì),那么會(huì)看到溶液變成紫色。
7、具有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)。
8、蛋白質(zhì)的肽鍵在堿性溶液中能與Cu2+絡(luò)合成紫色的絡(luò)合物。
9、顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比。
10、以上內(nèi)容參考:百度百科-雙縮脲試劑。
本文分享完畢,希望對(duì)大家有所幫助哦。
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