PCR擴增原理高中(pcr擴增原理)
哈嘍,大家好~~~我是小編田甜,關于PCR擴增原理高中,pcr擴增原理這個很多人還不知道,那么現(xiàn)在讓田甜帶著大家一起來看看吧!
1、基因的PCR擴增技術原理類似于DNA的變性和復制過程,即將待擴增的DNA片段和與其兩側互補的兩段寡聚核苷酸引物,經(jīng)變性、退火和延伸若干個循環(huán)后DNA擴增倍數(shù)可達2的n次方 倍。
2、 PCR反應的基本成分包括:模板DNA(待擴增DNA)、引物、4種脫氧核苷酸(dNTPs)、DNA聚合酶和適宜的緩沖液。
3、類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。
4、PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的高溫變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;②模板DNA與引物的低溫退火(復性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;③引物的適溫延伸:DNA模板--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補的半保留復制鏈重復循環(huán)變性-退火-延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。
5、每完成一個循環(huán)需2~4分鐘, 2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
本文分享完畢,希望對大家有所幫助哦。
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